單增李斯特氏菌驗(yàn)證培養(yǎng)基
（ L. mono Confirmatory HiVeg™ Agar Base）
貨號(hào) | 產(chǎn)品 | 原裝品名 | 規(guī)格 | 貨期 | 儲(chǔ)存 | 效期 |
MV1552 | 單增李斯特氏菌驗(yàn)證培養(yǎng)基 | L. mono Confirmatory HiVeg™ Agar Base | 100g(1.29L) 500g（6.49L） | 4-6周 | 30°C以下 | 見外包裝 |
FD212-5VL | 添加劑1 | L. mono Selective Supplement I | 5管(2.5L) | 4-6周 | 2-8°C | 見外包裝 |
FD213-5VL | 添加劑2 | L. mono Selective Supplement II | 5管(2.5L) | 4-6周 | 2-8°C | 見外包裝 |
FD227-5VL | 添加劑3 | L. mono Enrichment Supplement II | 5管(2.5L) | 4-6周 | -20°C | 見外包裝 |
應(yīng)用
*用于從臨床樣本和食品樣本中選擇鑒別性分離單核細(xì)胞增生李斯特菌。
單增李斯特氏菌驗(yàn)證培養(yǎng)基?原理和說明
單增李斯特氏菌驗(yàn)證培養(yǎng)基采用了無瘋牛病/傳染性海綿腦病風(fēng)險(xiǎn)的植物源特別蛋白胨，用于取代動(dòng)物源的特別蛋白胨。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌是一種革蘭氏陽性食物致病菌。它可造成孕婦嚴(yán)重感染，終導(dǎo)致流產(chǎn)、死胎、新生兒李斯特氏菌病和腦膜炎，或成人和青少年原發(fā)性菌血癥。
單核細(xì)胞增生李斯特氏菌同其他李斯特氏菌種的鑒別，是依據(jù)磷脂酰肌醇特異性磷脂酶C（PIPLC）活性（1,2）和α-甲基-D-甘露糖苷的發(fā)酵。磷脂酶C是一種重要的毒力因子，只有單核細(xì)胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌具有。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌水解培養(yǎng)基中的底物（FD227），菌落周圍產(chǎn)生不透明的光暈。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌和伊氏李斯特氏菌之間的鑒別是通過觀察α-甲基-D-甘露糖苷的發(fā)酵。單核細(xì)胞增生李斯特氏菌發(fā)酵α-甲基-D-甘露糖苷，在菌落周圍產(chǎn)生黃色光暈。伊氏李斯特氏菌不發(fā)酵α-甲基-D-甘露糖苷，菌落周圍也沒有黃色光暈。
培養(yǎng)基中的特殊蛋白胨、胰蛋白胨和大豆蛋白胨提供含氮物質(zhì)、*復(fù)合物和其他必需的營養(yǎng)成分。鼠李糖為發(fā)酵糖，酚紅為指示劑。氯化鈉維持滲透壓平衡。氯化鋰和添加劑1（FD181）抑制大多數(shù)革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌、酵母菌和霉菌生長。磷脂酶C水解添加劑2（FD214），通過在單增李斯特菌菌落周圍產(chǎn)生不透明的光環(huán)，用以證明PIPLC活性的存在。
單增李斯特氏菌驗(yàn)證培養(yǎng)基?培養(yǎng)基組分
成分 克/升
HiVeg特別蛋白胨 30.00
酵母膏 6.00
氯化鈉 5.00
氯化鋰 10.00
無水* 2.50
B.C.指示劑 8.60
α-甲基-D-甘露糖苷 3.00
瓊脂 12.00
終pH（25） 7.2±0.2
配置
稱量38.50g干粉溶于 470ml蒸餾水。加熱使全溶。15磅（121℃）滅菌15分鐘。冷卻至45-50℃。無菌添加復(fù)溶的選擇性添加劑1（貨號(hào)FD212）和添加劑2（貨號(hào)FD213）各1管、增菌添加劑II(貨號(hào)FD227)1管?；靹虿A注無菌平皿中。
警告：氯化鋰是有害的。避免身體接觸和吸入蒸氣。一旦與皮膚接觸，應(yīng)用大量水沖洗。
質(zhì)量控制
外觀：粉棕色均一自由流動(dòng)粉末。
成膠性：牢固，與1.2％瓊脂凝膠相當(dāng)。
成品顏色和透明度：紫色的不透明凝膠。
配比濃度：25℃時(shí)，7.7%水溶液（7.7g干粉/100ml蒸餾水）pH值為7.20±0.2
培養(yǎng)反應(yīng)
加入3種添加劑后35-37℃孵育24-48小時(shí)，觀察培養(yǎng)菌落特征
菌株（ATCC） | 接種（CFU） | 生長 | 回收率 | 菌落顏色 | PIPLC活性 |
白色念珠菌（10231） | 102-103 | 抑制 | 0% | - | - |
糞腸球菌（29212） | 102-103 | 抑制 | 0% | - | - |
大腸桿菌（25922） | 102-103 | 抑制 | 0% | - | - |
英諾克李斯特菌（33090） | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 黃色 | - |
格氏李斯特氏菌（19120） | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 黃色 | - |
伊氏李斯特菌（19119） | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 淡紫色 | + |
單核細(xì)胞增生李斯特氏菌（19118） | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 黃色 | + |
斯氏李斯特氏菌 | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 淡紫色 | - |
威氏李斯特氏菌 | 102-103 | 旺盛 | ＞50% | 黃色 | - |
1. 單核細(xì)胞增生李斯特氏菌
2. 伊氏李斯特菌
3. 英諾克李斯特菌
4. 斯氏李斯特氏菌
參考文獻(xiàn)
1. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 a), Industrie Alimentari 36, 1-3.
2. Ottaviani F., Ottaviani M., and Agosti M. (1997 b), Quimper Froid Symposium Proceedings p.6, A.D.R.I.A. Quimper, France, 16-18 June 1997.
