Human TGF-beta1 ELISA Kit采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人 TGF-β1 單克隆抗體預(yù)包被在高 親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過孵育，樣本 中存在的 TGF-β1 與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。

Human TGF-beta1 ELISA Kit檢測(cè)原理：本試劑盒采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附檢測(cè)技術(shù)。特異性抗人 TGF-β1 單克隆抗體預(yù)包被在高 親和力的酶標(biāo)板上。酶標(biāo)板孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品、待測(cè)樣本和生物素化的檢測(cè)抗體，經(jīng)過孵育，樣本 中存在的 TGF-β1 與固相抗體和檢測(cè)抗體結(jié)合。洗滌去除未結(jié)合的物質(zhì)后，加入辣根過氧化物酶標(biāo) 記的鏈霉親和素(streptavidin-HRP)。洗滌后，加入顯色底物 TMB，避光顯色。顏色反應(yīng)的深淺與 樣本中 TGF-β1 的濃度成正比。加入終止液終止反應(yīng)，在 450 nm 波長(zhǎng)(參考波長(zhǎng) 570 - 630 nm)測(cè)定 吸光度值。

Human TGF-beta1 ELISA Kit樣本采集與貯存

細(xì)胞培養(yǎng)上清

離心沉淀之后即刻檢測(cè)，或者分裝，-20℃及以下貯存。避免反復(fù)凍融。 注意: 細(xì)胞培養(yǎng)基中的動(dòng)物血清可能含有高濃度的潛隱 TGF-β1。為了獲得的實(shí)驗(yàn)結(jié)果， 在 TGF-β1 測(cè)定試驗(yàn)中使用不含動(dòng)物血清的細(xì)胞培養(yǎng)基。如果使用了含有動(dòng)物血清的細(xì)胞培養(yǎng)基， 應(yīng)該設(shè)立適當(dāng)?shù)膶?duì)照，確定 TGF-β1 的基準(zhǔn)濃度。

血清樣本

血清分離管采集血清，室溫凝集 30 分鐘。2 - 8℃放置過夜，以便*釋放 TGF-β1。1000 g 離心 10 分鐘。吸取血清樣本之后即刻檢測(cè)，或者分裝，-20℃及以下貯存。避免反復(fù)凍融。 尿液樣本 無菌收集晨尿中段，1000 g 離心 10 分鐘除雜。即刻檢測(cè)，或者分裝，-20℃及以下貯存。避 免反復(fù)凍融。 注意：未激活的尿液樣本在 24 小時(shí)之內(nèi)，不論是冷藏還是冷凍，表現(xiàn) TGF-β1 濃度降低。樣本的貯存條件和貯存期盡量保持*。

血漿樣本

EDTA 作為抗凝劑，采血后 30 分鐘之內(nèi)，1000 g 離心 15 分鐘收集血漿。推薦再增加一次離心， 2 - 8℃，10000 g 離心 10 分鐘，*的去除血小板。即刻檢測(cè)，或者分裝，-20℃及以下貯存。避免反復(fù)凍融。 血小板顆粒中 TGF-β1 的釋放取決于血小板的活化。因此，測(cè)定 TGF-β1 外周水平，應(yīng)該收集 貧血小板的血漿樣本，值得注意的是，臨床實(shí)驗(yàn)室收集血漿樣本的很多操作規(guī)范（美國(guó)臨床實(shí)驗(yàn) 室標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)），都沒有*的去除血漿樣本中的血小板。這就導(dǎo)致因血小板活化釋放 TGF-β1， 造成實(shí)驗(yàn)結(jié)果的變異和不可重復(fù)。推薦的血漿樣本收集步驟，zui小化因血小板脫顆粒釋放 TGF-β1 所帶來的影響。然而，即使是的操作規(guī)范，也不能*去除某些血小板偶然脫顆粒。 注意：在分析前，冷凍樣本應(yīng)該緩慢的恢復(fù)至室溫，輕柔的混勻。 

Human TGF-beta1 ELISA Kit靈敏度： 人 TGF-β1 的zui低可檢測(cè)濃度為 3.36 pg/ml。 10 個(gè)零標(biāo)準(zhǔn)品濃度 OD 的平均值加上兩倍 SD，計(jì)算zui低可檢測(cè)濃度。