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如何用凱氏定氮儀檢測大米蛋白質(zhì)

2020年06月24日 13:24

　　蛋白質(zhì)含量是大米品質(zhì)的指標(biāo)之一。常用的檢測蛋白質(zhì)含量的凱氏定氮儀一般用于檢測大豆、小麥和乳制品。凱氏定氮儀應(yīng)該怎么檢測大米的蛋白質(zhì)含量呢？

　　試劑：

　　鹽酸、氫氧化鈉、濃硫酸、硼酸、甲基紅：分析純

　　溴甲酚綠：指示劑

　　尿素：99.9%

　　全麥粉粗蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)

　　銅催化劑：4.5 g K2SO4+0.5 g CuSO4﹒5H2O/片

　　試劑配置：

　　1.鹽酸標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液(0.1 mol/L) 按GB/T 601-2016配置及標(biāo)定。

　　2.氫氧化鈉溶液(400 g/L) 稱取4000 g氫氧化鈉溶于水，冷卻后稀釋至10 L。

　　3.硼酸吸收溶液(含溴甲酚綠和甲基紅指示劑)：

　　(1) 1%硼酸：將100 g硼酸溶于10 L純水中。

　　(2) 0.1%溴甲酚綠溶液：0.1 g溴甲酚綠溶于100 mL95%乙醇中。

　　(3) 0.1%甲基紅溶液：0.11 g甲基紅溶液100 mL溶于 95%乙醇中。

　　(4)在10L1%的硼酸溶液中加人100 mL1%溴甲酚綠和70 mL 1%甲基紅溶液混勻。

　　試驗方法

　　1.樣品制備用中藥粉碎機粉碎大米，并過100目篩。

　　2.單因素試驗參考GB 5009.5- 2016及定氮儀簡報，用消化爐消化樣品，全自動凱氏定氮儀測定蛋白質(zhì)。以蛋白質(zhì)含量為指標(biāo)，分別考察樣品質(zhì)量、濃硫酸添加量、消化溫度、消化時間4個因素對大米蛋白質(zhì)測定值的影響。

　　3.正交試驗根據(jù)單因素試驗結(jié)果選取合理水平設(shè)計正交試驗。

　　4.精密度及準(zhǔn)確度試驗稱取6個平行樣品進行精密度試驗，稱取3個平行樣品，加入尿素純度標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)進行加標(biāo)回收試驗，同時利用全麥粉粗蛋白質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)考察準(zhǔn)確度。

　　5.數(shù)據(jù)處理試驗數(shù)據(jù)用SPSS數(shù)據(jù)分析軟件進行單因素方差分析并進行Duncan多重比較。

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