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色譜柱是高效液相色譜儀的重要組成部分，在色譜儀分析系統(tǒng)中起著分離作用，是色譜分析的核心部件，對(duì)高效液相色譜柱的正確使用不僅能延長色譜柱的使用壽命，還能有效保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

以下簡單介紹液相色譜柱

在使用過程中應(yīng)當(dāng)注意的問題

01

性能測試

新色譜柱使用前，應(yīng)進(jìn)行柱的性能測試，并將結(jié)果保存起來，作為今后評(píng)價(jià)柱性能變化的參考依據(jù) (柱性能由于所使用的樣品、流動(dòng)相、柱溫等條件的差異有所不同，在測試中需保證方法一致性）。

02

流動(dòng)相的配制

液相色譜是通過樣品組分在柱填料與流動(dòng)相之間質(zhì)量交換而達(dá)到分離的目的，因此要求流動(dòng)相具備以下的特點(diǎn)：

• 流動(dòng)相對(duì)樣品具有一定的溶解能力，保證樣品組分不會(huì)沉淀在柱中（或長時(shí)間保留在柱中）。

• 流動(dòng)相具有一定惰性，與樣品不產(chǎn)生化學(xué)反應(yīng)。

• 流動(dòng)相的黏度要盡量小，以便在使用較長的分析柱時(shí)既能得到好的分離效果，同時(shí)又降低柱壓，延長柱子的使用壽命（可運(yùn)用提高溫度的方法降低流動(dòng)相的黏度）。

• 流動(dòng)相的物化性質(zhì)與使用的檢測器相適應(yīng)。

• 流動(dòng)相沸點(diǎn)不要太低，否則容易產(chǎn)生氣泡，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)無法進(jìn)行。

• 流動(dòng)相配制好后，一定要進(jìn)行脫氣，除去溶解在流動(dòng)相中的微量氣體。

03

新色譜柱使用前沖洗步驟

1、首先查看色譜柱的說明書，注意色譜柱封存的溶劑、推薦流速、pH值、耐受柱壓、及使用溫度等信息。

2、如分析使用的流動(dòng)相與色譜柱內(nèi)儲(chǔ)存的溶劑混溶，可以直接使用流動(dòng)相參照色譜柱說明書中推薦的流速、溫度等條件沖洗色譜柱20倍柱體積以上。如果分析條件使用的流動(dòng)相與色譜柱內(nèi)儲(chǔ)存的溶劑不混溶，請(qǐng)選擇與色譜柱內(nèi)儲(chǔ)存溶劑和流動(dòng)相都混溶的溶劑，作為置換溶劑，逐步置換到分析使用的流動(dòng)相。每次置換均應(yīng)沖洗色譜柱20倍柱體積以上。

04

日常使用注意事項(xiàng)

1、請(qǐng)使用HPLC級(jí)別以上的試劑作為流動(dòng)相。

2、流動(dòng)相要用0.45um孔徑以下的微孔濾膜濾過。

3、流動(dòng)相的pH值不能超出色譜柱的適用范圍。

4、注意流動(dòng)相的流動(dòng)方向要與色譜柱標(biāo)識(shí)的方向一致。

5、容易滋生微生物的流動(dòng)相不要存放過久，要及時(shí)換新，以免微生物滋生污染色譜柱。

6、色譜柱分析結(jié)束后要及時(shí)*沖洗。

7、長時(shí)間不用的色譜柱要將流動(dòng)相置換為色譜柱保存的溶劑，并兩端用堵頭封死保存。

8、色譜柱要避免劇烈碰撞、跌落等。

05

流動(dòng)相流速的選擇

因柱效是柱中流動(dòng)相線性流速的函數(shù)，使用不用的流速可得到不同的柱效。對(duì)于一根特定的色譜柱，要追求較佳柱效，應(yīng)使用*流速。對(duì)內(nèi)徑為4.6mm的色譜柱，流速一般選擇1mL/min，對(duì)于內(nèi)徑4.0mm柱，流速0.8mL/min為更佳。當(dāng)選用*流速時(shí)，分析時(shí)間可能延長?？刹捎酶淖兞鲃?dòng)相的洗滌強(qiáng)度的方法以縮短分析時(shí)間（如使用反相柱時(shí)，可適當(dāng)增加有機(jī)試劑甲醇或乙腈的含量）。

液相色譜柱在色譜分析中起著至關(guān)重要的角色，是樣品分離的核心，正確使用色譜柱才能達(dá)到更好的理想的分離效果，提高色譜柱的使用壽命。

島津液相色譜儀LC-40

融合“AI”與”loT”技術(shù)的液相色譜儀

• 診斷精靈＆修復(fù)精靈

智能判斷流動(dòng)相中氣泡的存在，主動(dòng)排氣，自動(dòng)重啟分析序列

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智能流量控制，流速逐漸增加至柱溫設(shè)定值，保護(hù)色譜柱

• 流動(dòng)相精靈

儲(chǔ)液盤內(nèi)置傳感器，實(shí)時(shí)監(jiān)測流動(dòng)相剩余量

• 溶劑配置精靈

自動(dòng)以任意比例混合流動(dòng)相，方便、準(zhǔn)確地制備出分析所需流動(dòng)相

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空氣循環(huán)制冷控溫模塊，防止熱空氣進(jìn)入樣品倉形成冷凝水

• 譜峰解析精靈

zui小肩縫提取，共流出峰切割，線性范圍拓展