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ELISA試劑盒檢測(cè)技術(shù)服務(wù)標(biāo)準(zhǔn)

來源: 北京冬歌生物科技有限公司    2014年12月05日 10:13  
一、服務(wù)內(nèi)容

凡購買本司任何一種酶聯(lián)免疫檢測(cè)試劑盒,您只需將需要檢測(cè)的動(dòng)物(Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……)種類和檢測(cè)指標(biāo)(介素類、因子類)及標(biāo)本數(shù)量(48T/96T)告知我司業(yè)務(wù)人(張)員即可。在接到客戶標(biāo)本當(dāng)日起,兩周內(nèi)將檢測(cè)報(bào)告交到客戶手中。

二、質(zhì)量保證

北京冬歌生物科技有限公司提供的檢測(cè)用所有試劑,適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,靈敏度*,多年專業(yè)酶免服務(wù),我們保證對(duì)所售任何產(chǎn)品一概負(fù)責(zé)到底,每一份實(shí)驗(yàn)結(jié)果都真實(shí)可靠。

三、注意事項(xiàng)

在收集標(biāo)本前都必須有一個(gè)完整的計(jì)劃,必須清楚要檢測(cè)的成份是否足夠穩(wěn)定。我們提倡新鮮標(biāo)本盡早檢測(cè),對(duì)收集后當(dāng)天就進(jìn)行檢測(cè)的標(biāo)本,及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?,如有特殊原因需要周期收集?biāo)本,請(qǐng)?jiān)炷H〔暮螅瑢?biāo)本及時(shí)分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。因冰室與室溫存在一定溫差,蛋白極易降解,直接影響實(shí)驗(yàn)質(zhì)量,所以避免反復(fù)凍融。代測(cè)放免標(biāo)本的客戶取材前須向我司銷售人員索要說明書,具體操作注意事項(xiàng)請(qǐng)與我司技術(shù)人員溝通。

四、液體類標(biāo)本

包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

1、血清:

室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

2、血漿:

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

3、尿液:

用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

4、細(xì)胞培養(yǎng)上清:

檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5、組織標(biāo)本:

切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。

五、ELISA方法簡介

1、 包被抗原:稀釋液pH 9.6 碳酸鹽緩沖液,多肽濃度2ug/ml,0.1ml/孔,4oC,洗凈

2、 1%BSA (pH 9.6 碳酸鹽緩沖液) 封閉,0.1ml/孔,37oC1h,洗凈

3、 稀釋抗血清(可稀釋不同濃度) 0.1ml/孔,37oC 30分鐘,洗凈

4、 稀釋辣根過氧化物每標(biāo)記的二抗 0.1ml/孔,37oC 40分鐘,洗凈

5、 顯色:TMB顯色

A液:四甲基聯(lián)苯胺10mg 溶于DMF1ml中,再用pH5.0檸檬酸緩沖液稀釋100倍

B液:5ul雙氧水加蒸餾水12.5ml

終止液:2N硫酸

A液、B液各一滴,比光顯色10分鐘,終止液一滴

6、 450nm 波長 測(cè)OD值

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