移動端
直播推薦
回放
回放
分子生物學是在分子水平研究蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子結(jié)構(gòu)與功能的學科，是生物學的前沿領(lǐng)域。分子生物學的研究需要對生物大分子進行檢測，常用的儀器包括PCR儀、核酸提取儀等。除了專門的分子生物學儀器，通用的化學分析儀器也在分子生物學中有廣泛的應用，比如紫外分光光度計。
紫外分光光度計在分子生物學中主要有以下幾點應用：
1.蛋白質(zhì)含量測定
(1)直接定量法：
利用紫外分光光度計直接定量檢測蛋白質(zhì)含量是利用蛋白質(zhì)含有的*和*在紫外光區(qū)280 nm處具有大吸收的特征，根據(jù)該波長的吸光度與蛋白質(zhì)濃度成正比的關(guān)系測定其含量。
直接定量法適合測試較純凈、成分相對單一的蛋白質(zhì)。特點在于快速簡便，缺點包括易受到平行物質(zhì)如DNA的干擾、敏感度差、要求蛋白的濃度較高等。
(2)比色法：蛋白質(zhì)的組成成分氨基酸與外加的顯色基團或染料反應，產(chǎn)生有色物質(zhì)。有色物的濃度與氨基酸的數(shù)量相關(guān)，從而反映蛋白質(zhì)濃度。常見方法包括BCA、Bradford、Lowry等幾種。
2.核酸濃度測定和純度判定
核酸的大吸收波長是260 nm，蛋白質(zhì)的大吸收波長是280 nm。在波長260 nm的紫外線下，1 OD值光密度相當于約50 μg/mL雙鏈DNA，約40 μg/mL單鏈DNA或RNA。通過OD260與OD280的比值還可初步判斷核酸的純度，純DNA和RNA樣品的0D260/280分別為1.8和2.0，若樣品中有蛋白質(zhì)或酚的污染，比值將低于此值。
紫外分光光度計一般只能測定質(zhì)量濃度大于0.25 μg/mL的核酸濃度。
3.細菌密度測定
通常情況下，根據(jù)經(jīng)驗和目測推斷細菌的生長密度和生長期，而OD600是用來檢測細菌濃度的重要指標，是追蹤液體培養(yǎng)物中微生物生長的標準方法。實驗中以未加菌液的培養(yǎng)液作為空白液，再定量培養(yǎng)后的含菌培養(yǎng)液。注意受試的樣品不能離心，要保持細菌懸浮狀。
紫外分光光度法是基礎(chǔ)的光譜分析方法，根據(jù)被測量物質(zhì)分子對紫外-可見波段范圍單色輻射的吸收或反射強度來進行物質(zhì)的定量、定性或結(jié)構(gòu)分析。紫外分光光度法的應用很廣泛，可用于化學、材料、生物、醫(yī)學、食品、環(huán)境等領(lǐng)域。分子生物學中的應用是指其中的一小部分。
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
浙公網(wǎng)安備 33010602002722號
第四屆全國光譜大會
展會城市：株洲市展會時間：2025-05-08