ANNEXIN V- FITC/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒
英文名稱：Annexin V-FITC Apoptosis Detection Kit
規(guī)格：20T ; 50T ; 100T
儲(chǔ)存條件：2-8℃，避光，有效期1年
單位：盒

詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū)

ANNEXIN V- FITC/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒

ANNEXIN V- FITC/PI 凋亡檢測(cè)試劑盒操作步驟: 

1. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備： 

a)對(duì)于貼壁細(xì)胞：小心收集細(xì)胞培養(yǎng)液到一離心管內(nèi)備用。用不含 EDTA 的pancreatin消化細(xì)胞，至細(xì)胞可以被輕輕用移液管或槍頭吹打下來(lái)時(shí)，加入前面收集的細(xì)胞培養(yǎng)液，吹打下所有的貼壁細(xì)胞，并輕輕吹散細(xì)胞。再次收集到離心管內(nèi)。1000rpm 左右離心 5min，沉淀細(xì)胞。對(duì)于特定的細(xì)胞，如果細(xì)胞無(wú)法離心至離心管底，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約 50µl 左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細(xì)胞。加入約 1ml 4℃預(yù)冷的 PBS，重懸細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞，小心吸除上清。 

b)對(duì)于懸浮細(xì)胞：1000rpm 左右離心 5min，沉淀細(xì)胞。對(duì)于特定的細(xì)胞，如果細(xì)胞無(wú)法離心至離心管底，可以適當(dāng)延長(zhǎng)離心時(shí)間或稍稍加大離心力。小心吸除上清，可以殘留約 50µl 左右的培養(yǎng)液，以避免吸走細(xì)胞。加入約 1ml 4℃預(yù)冷的 PBS，重懸細(xì)胞，再次離心沉淀細(xì)胞，小心吸除上清。 

2. 用去離子水按 1:9 稀釋 Binding Buffer (2ml 10x Binding Buffer+18ml 去離子水)； 

3. 用 1x 結(jié)合緩沖液重新懸浮細(xì)胞，調(diào)節(jié)其濃度為 1-5×106/ml； 

4. 取 100µl 的細(xì)胞懸液于 5ml 流式管中，加入 5µl Annexin V/FITC 混勻后于室溫避光孵育 5 分鐘； 

5. 加入 5µl 的碘化丙錠溶液(PI)，并加 400µl PBS，立刻進(jìn)行流式或熒光顯微鏡檢測(cè)。