如何減少液相色譜的基線噪音

點(diǎn)擊次數(shù)：564 發(fā)布時(shí)間：2014-11-30

     在液相色譜儀的操作過(guò)程中，經(jīng)常會(huì)產(chǎn)生一些基線噪音，如何在使用過(guò)程中來(lái)避免這些噪音的產(chǎn)生，在本文中會(huì)為大家做一詳細(xì)介紹。

1.流動(dòng)相的在線混合
      所有的流動(dòng)相在線混合都是從方便出發(fā)的結(jié)果，流動(dòng)相混合的不充分是基線噪音的一個(gè)重要
來(lái)源。混合方式主要有兩種：
a．低壓混合：采取時(shí)間脈沖的方式，利用比例閥，將不同流動(dòng)相按一定比例混合。 
b．高壓混合：利用多個(gè)泵，控制每個(gè)泵的流量，將不同的流動(dòng)相按一定比例混合。
在流動(dòng)相混合后，一般都有一個(gè)混合器（Mixer）來(lái)幫助混合，使之更加充分。從流動(dòng)相開(kāi)始
混合在一起，到流動(dòng)相到達(dá)色譜柱頭，這一段體積叫做延遲體積（Delay Volume）。Mixer體積
越大，混合越好，但是相應(yīng)延遲體積就越大，造成梯度的延遲。換句話說(shuō)，就是流動(dòng)相的變化，
需要一定時(shí)間后，才能真正到達(dá)色譜柱，對(duì)分離產(chǎn)生影響。這個(gè)現(xiàn)象在使用UPLC或者UHPLC
的時(shí)候，會(huì)有比較明顯的作用。

      為什么相同梯度方法，在不同儀器，或者不同品牌的儀器之間轉(zhuǎn)化時(shí)，保留時(shí)間可能不一樣？
       其主要原因就是延遲體積的不同。
       在線混合很難做到非常均一的混合效果，這個(gè)在示差檢測(cè)器（RID）上的效果zui明顯。這也
是為什么示差檢測(cè)器都要求將流動(dòng)相預(yù)混到一個(gè)瓶子里，不能走梯度的原因。
        那如何減小因?yàn)榛旌隙斐傻幕€噪音呢？

a.對(duì)于等度的方法，非常簡(jiǎn)單，預(yù)混流動(dòng)相就可以了。
b．對(duì)于梯度的方法，部分預(yù)混流動(dòng)相也會(huì)幫助更好的混合，怎么做呢？看下面的例子。
方法要求乙腈/水比例從10%走到85%。 那可以將流動(dòng)相A配成10%的乙腈，流動(dòng)相B
配成85%的乙腈，然后A/B梯度從0%走到100%。 這就是部分預(yù)混。

c．增大Mixer的體積。一般mixer的體積從幾百ul到幾個(gè)ml都有，在允許的延遲時(shí)間下，
更換一個(gè)體積更大的Mixer，能夠有效提高混合的效率。每個(gè)色譜生產(chǎn)廠家的Mixer體積都不一樣，基本都可以混用。
 

        ......

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